熒光光度法測定影響熒光強度的外部因素

1）溫度 溫度降低，熒光效率和熒光強度升高。

2）溶劑 隨著溶劑的極性的增加，熒光物質的π→π* 躍遷幾率增加，熒光強度將增強，熒光波長也 發生紅移；溶劑粘度降低，熒光強度降低；溶 劑應達到足夠的純度。 化學工程與現代材料學院

3）pH值 ?具酸或堿性基團的熒光物質，在不同pH值時，其 結構可能發生變化，因而熒光強度將發生改變。 NH3+ OHH+ NH2 OHH+ NH- ?利用金屬離子與有機試劑生成配合物進行測定金 屬離子時，配合物的穩定性和組成受溶液pH值影 響較大，從而影響到它們的熒光性質。 Ga3++鄰－二羥基偶氮苯 Ga3++鄰－二羥基偶氮苯 化學工程與現代材料學院 pH 3~4 pH 6~7 1:1配合物(產生熒光) 1:2配合物(不產生熒光)

4)散射光 瑞利散射光(Rayleigh scattering light)：光子與物 質分子發生彈性碰撞，不發生能量交換，運動方 向改變；λ瑞利光＝λ入射光 拉曼散射光(Raman scattering light) ：光子與物 質分子發生非彈性碰撞，發生能量交換，運動方 向改變；λ拉曼光≠λ入射光 消除方法：選擇適當的激發波長 化學工程與現代材料學院 448 320 a.強度 360 激發 320nm 硫酸奎寧 448 350 激發 350nm 硫酸奎寧 b.強度 320 激發 320nm 0.1mol/L硫酸 360 350 激發 350nm 0.1mol/L硫酸 400 硫酸奎寧在不同激發波長下的熒光

（a）與拉曼光譜（b） 化學工程與現代材料學院 在不同波長激發光下主要溶劑的拉曼光波長(nm) 溶劑 水 乙 醇 環己烷 CCl4 CHCl3 248 271 267 267 — — 激發光(nm) 313 365 405 350 416 469 344 409 459 344 408 458 320 375 418 346 410 461 436 511 500 499 450 502 化學工程與現代材料學院

5) 熒光熄滅 熒光熄滅（熒光猝滅）：熒光物質分子與溶劑分 子或其他溶質分子的相互作用引起熒光強度降低 的現象稱為熒光熄滅。 熒光熄滅劑：能引起熒光熄滅的物質。 導致熒光熄滅的原因： ?碰撞猝滅 M+hv→M*,M*+Q → M+熱 ?靜態猝滅 M+Q → MQ 非熒光物質 ?轉入三重態的猝滅 三重態 ?熒光物質的自猝滅 熒光物質濃度較高 ?氧的熄滅作用 化學工程與現代材料學院 熒光熄滅法: 熒光物質加入某種熄滅劑后，其熒 光強度的減少與熒光熄滅劑的濃度呈線性關系， 可用于測定熄滅劑的含量，這種方法稱為熒光熄滅法。

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